10641年

NPRL2

NPR2 | NPR2L | TUSC4;氮通透酶regulator-like 2(酵母);NPRL2;氮通透酶regulator-like 2(酵母)

2810446 g01rik | | G21蛋白质NPR2-like蛋白质基因21 | |同源酵母氮通透酶(候选肿瘤抑制)|氮通透酶调节器2蛋白质|肿瘤抑制候选人4

3 . 3

蛋白质编码

我们使用重叠和嵌套纯合缺失、重叠群建筑,基因组测序,和身体和记录映射进一步定义一个大约630 kb的肺癌症带有一个或多个纯合子缺失区域肿瘤抑制或基因s (次数3 . 3号染色体上。这个位置被确定通过体细胞基因在肿瘤,抽搐的映射癌症细胞系,肺癌和乳腺癌癌变前的病变,包括发现的几个纯合缺失。分子的结合手工计算预测方法和允许我们检测,隔离,描述和注释一组25基因年代,可能构成完整的组蛋白编码基因年代住在这大约630 kb的序列。19岁的一个子集基因删除重叠区域内的年代被发现大约370 kb。这个区域进一步细分了嵌套200 - kb的乳房癌症纯合子缺失分为两基因集:8基因年代躺在近端大约120 kb段和11基因年代躺在远端大约250 kb。这19基因年代广泛进行了分析和计算方法的测试手册损失的方法表达式和突变在肺癌症年代确定候选人次数在这一组。四个基因年代显示亏损,表达式或在非小细胞肺癌mRNA水平降低癌症(CACNA2D2 / alpha2delta-2 SEMA3B[从前改装车零配件(V),布鲁和HYAL1)或小细胞肺癌癌症(SEMA3B布鲁和HYAL1)细胞系。我们发现6的基因两个或两个以上的氨基酸sequence-altering年代突变年代包括布鲁NPRL2 /基因21日FUS1、HYAL1 FUS2, SEMA3B。然而,没有一个19基因年代测试突变显示频繁(> 10%)突变在肺癌症样本。这使我们排除一些的基因在该地区年代经典肿瘤抑制或年代的零星的肺癌症。另一方面,假定的肺癌症次数在这个位置可能被tumor-acquired启动子甲基化灭活或属于haploinsufficient的小说类基因年代,使癌症半合(+ / -)状态,但没有显示突变在剩余的野生型等位基因的肿瘤。我们讨论数据的上下文中小说和经典癌症基因模型应用于肺carcino基因sis。进一步的功能测试的关键基因年代基因转让和基因中断策略应该允许识别的假定的肺癌症次数(s),卢卡,大约630 kb序列的分析也提供了一个机会,调查和了解基因组结构、进化,这种相对的功能性组织基因丰富的地区。

一群候选人肿瘤抑制或基因(指定CACNA2D2 PL6 101 f6, NPRL2布鲁RASSF1, FUS1, HYAL2,和HYAL1)已被确定在120 kb的关键肿瘤纯合缺失区域(在肺癌和乳腺癌癌症人类染色体3 . 3 s)。我们研究了影响六3 . 3基因s (101 f6, NPRL2布鲁FUS1, HYAL2,和HYAL1)在人类肺癌肿瘤细胞增殖和细胞凋亡癌症细胞重组adenovirus-mediated基因转移在体外和体内。我们发现,迫使表达式野生型FUS1 101 f6, NPRL2基因年代显著抑制肿瘤细胞生长,诱导细胞凋亡和细胞周期的改变流程3 . 3 120 - kb region-deficient(纯合子)H1299 A549细胞而不是3 . 3 120 - kb region-heterozygous H358和正常的人类支气管上皮细胞。瘤内注射的广告- 101 f6 Ad-FUS1, Ad-NPRL2, Ad-HYAL2显著protamine-complexed向量的向量或系统性管理抑制ed的增长H1299 A549肿瘤异种移植和抑制A549ν/ν小鼠实验性肺转移。在一起,我们的结果,加上其他研究证明肿瘤抑制或角色RASSSF1A同种型,表明多个连续的基因s的3 . 3 120 - kb的染色体区域可能出现肿瘤抑制或活动在体外和体内。

初步分析确定了NPRL2 / G21基因位于3 p21.3c,肺癌症地区,作为一个强有力的候选人肿瘤抑制或基因。这里我们提供额外的证据肿瘤抑制或NPRL2 / G21的函数。的基因具有高度保守的同系物/直接同源从酵母到人类。NPR2酵母直接同源,显示了三个高度保守的地区32个身份在整个长度的36%。通过序列分析,主要产品NPRL2 / G21编码的可溶性蛋白质由两部分构成的核本地化信号,此种域中,相似性杂种狗的核心领域,新发现氮通透酶调节器2域与未知函数。的基因是许多组织中高度表达。我们报告灭活突变在各种肿瘤和癌症细胞系,增长抑制肿瘤细胞的离子tet-controlled NPRL2 / G21反式基因在塑料培养皿,抑制离子SCID小鼠的肿瘤形成。筛选7肾、肺5和7宫颈癌细胞系表现出纯合缺失在3月底NPRL2 2肾,3肺,颈1(海拉)细胞系。删除的3部分NPRL2可能导致拼接不当,导致的损失1.8 kb功能NPRL2信使rna。我们推测,NPRL2 / G21核内蛋白可能参与了错配修复,细胞周期检查点信号,激活凋亡通路(年代)。酵母NPR2顺铂被证实是一个目标,这表明人类NPRL2 / G21可能发挥类似的作用。至少两个纯合子缺失NPRL2 / G21 6肿瘤活检中发现从不同位置和微卫星不稳定。这项研究中,与先前获得的结果,表明NPRL2是多个肿瘤抑制或基因。

NPRL2是这部小说的候选人之一肿瘤抑制或基因年代确定在人类染色体3 . 3。NPRL2显示有效的肿瘤抑制离子活度体外和体内一直建议参与DNA错配修复,细胞周期检查点信号和凋亡的调节通路。在这项研究中,我们分析了内生表达式的NPRL2蛋白质和在40肺癌细胞对顺铂的反应癌症细胞系和发现表达式NPRL2明显,互为关联的顺铂敏感性,斯皮尔曼相关系数为-0.677 (P < 0.00001)。介绍了体内表达式NPRL2的N - [1 - (2, 3-dioleoyloxyl)丙基]-NNN-trimethylammoniummethyl硫酸:胆固醇nanoparticle-mediated基因转移显著resensitized顺铂的反应,产生40%的更大的抑制肿瘤细胞生存能力,导致2 - 3重激活诱导细胞凋亡的增加还存在多个NPRL2-transfected细胞相比untransfected细胞在同等剂量的顺铂。此外,全身治疗与NPRL2纳米颗粒和顺铂在人类H322肺癌症原位小鼠模型的治疗效果显著增强顺铂和克服cisplatin-induced阻力(P < 0.005)。这些发现表明潜在的NPRL2作为预测生物标志物顺铂的反应肺癌症病人和作为增强反应和分子治疗代理resensitizing nonresponders顺铂治疗。

背景/目的:Hepatocarcino基因sis是一个多因素,多步骤的过程,涉及到的激活onco基因或失活肿瘤抑制或基因年代在肝细胞癌(HCC)进展的不同阶段。NPRL2是候选人之一肿瘤抑制或基因年代确定3 . 3号染色体上的一个地区,经常包含基因抽搐异常发现在早期阶段的各种人类的发展癌症年代。在当前的研究中,我们旨在评估NPRL2表达式在肝细胞癌和探索NPRL2的预后意义。方法:我们研究了NPRL2信使rna表达式70年肝癌标本,使用定量实时逆转录聚合酶链反应分析,和NPRL2之间的相关性表达式和临床病理的参数。结果:发现NPRL2 mRNA表达同样在肝细胞癌组织和相应的非癌症我们的肝脏组织。然而,高NPRL2表达式与肿瘤大小显著相关(P = 0.0062)和血清PIVKA-II水平(P = 0.0002)。单变量和多变量分析表明,高NPRL2 mRNA表达式是一个独立的预后因素总体存活率(风险比0.39;P < 0.0001)。结论:我们的研究结果表明,NPRL2 mRNA表达式已经对肝癌患者的生存预后意义。

Npr2,公认的“氮通透酶调节器”和人类的相同器官肿瘤抑制或NPRL2,被发现与Grr1交互,现金流量表的盒组件(Grr1) (Skp1-cullin-F-box蛋白质复杂的包含Grr1) E3泛素连接酶,由大众spectrometry-based多维蛋白质识别技术。Npr2有两个序列和害虫ubiquitinated蛋白质中已被确认。像其他Grr1目标,Npr2磷蛋白质。磷酸化Npr2 grr1Delta突变体中积累,Npr2稳定与灭活细胞水解酶。磷酸化和不稳定取决于I型酪蛋白激酶(对照)Yck1 Yck2。在表达式的Npr2是有害的在grr1Delta突变细胞,是致命的。Npr2强劲增长需要定义中含有铵和尿素作为氮源,但不增长丰富的媒介。npr2Delta突变体也无法有效地完成减数分裂。在一起,这些数据表明Npr2 phosphorylation-dependent目标的自洽场(Grr1) E3泛素连接酶,在细胞生长中发挥作用在一些氮来源。

背景:人类染色体的短臂3参与很多的发展癌症年代包括肺癌症。三个善意的肺癌症肿瘤抑制或基因年代即RBSP3 (AP20区域),NPRL2和RASSF1A基因(卢卡地区)3 . 3地区被确定。我们先前已经表明,纯合子缺失AP20和卢卡次区域通常发生在同一肿瘤(P < 10 - 6)。方法:我们估计的数量RBSP3, NPRL2, RASSF1A基因,GAPDH, RPN1信使rna和DNA拷贝数RBSP3 59原发性非小细胞肺癌癌症年代,包括41鳞状细胞和腺癌18基于TaqMan即时逆转录-聚合酶链反应技术和相对量化。结果:我们评估mRNA水平之间的关系,在非小细胞肺癌临床病理的特点癌症。一个重要的表达式减少(> = 2)为所有三个被发现基因年代初在肿瘤发展:在85%的情况下RBSP3;RASSF1A基因NPRL2为73%和67% (P < 0.001),明显在鳞状细胞癌。强大的抑制离子的,NPRL2 RBSP3被认为在100%的情况下已经在舞台上我的鳞状细胞癌。放松管制RASSF1A基因与肿瘤进展相关的鳞状细胞(P = 0.196)和腺癌(P < 0.05)。最有可能的是,基因抽搐和epi基因抽搐的机制可能是负责RBSP3转录失活在非小细胞肺癌癌症根据NotI RBSP3年代基因启动子甲基化微阵列数据中检测出80%的鳞状细胞和腺癌的38%。与NotI微阵列我们测试频率卢卡(NPRL2 RASSF1A基因)和AP20 (RBSP3)区域删除或甲基化在同一肿瘤样本,发现这发生在所有研究样品的39% (P < 0.05)。结论:我们的数据支持这一假说次数参与肿瘤基因非小细胞肺癌的sis。这两个基因抽搐和epi基因这三个的抽搐机制有助于下调基因代表两个肿瘤抑制或3 . 3集群。最重要的是表达式RBSP3 NPRL2和RASSF1A基因在相同样品的同时减少原发性非小细胞肺癌:在所有这三个病例的39%基因年代显示减少表达式(P < 0.05)。